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醫(yī)療激光新聞

聯(lián)合應(yīng)用激光射的過氧化物酶染色技術(shù)來進行白細胞分類計數(shù)

星之球科技 來源:百度2020-03-30 我要評論(0 )   

光散射與細胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細胞分類計數(shù):聯(lián)合應(yīng)用激光射的過氧化物酶染色技術(shù)來進行白細胞分類計數(shù)。嗜酸性粒細胞有很強的過氧化物酶活性,中性粒細胞有較強的...

光散射與細胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用于白細胞分類計數(shù):聯(lián)合應(yīng)用激光射的過氧化物酶染色技術(shù)來進行白細胞分類計數(shù)。嗜酸性粒細胞有很強的過氧化物酶活性,中性粒細胞有較強的過氧化物酶活性,單細胞資助之,而淋巴細胞和嗜堿性粒細胞均無此酶。


將血興高采烈經(jīng)過氧化物酶染色后,胞質(zhì)內(nèi)即可出現(xiàn)不同的酶化學(xué)反應(yīng),由此構(gòu)成了此種血液分析儀的分析基礎(chǔ),化妝品的分血器將血加入到含有清洗劑和甲醛的高滲液體內(nèi)(21倍稀釋)并孵育(400~700)20秒鐘。其中清洗劑(含有非離子表面活性劑)使細胞破壞,甲醛使白細胞質(zhì)內(nèi)酶被固定,此后發(fā)生第二步反應(yīng),即加入過氧化氫和4氯=蔡酚,并加熱13秒,此時如果待測細胞質(zhì)中含有過氧化酶即可分解H2O2產(chǎn)生[O],后者可使4氯-蔡酚顯色并沉積定位于酶反應(yīng)部位,此類細胞通過測試區(qū)時,由于酶反應(yīng)強度不同(陰性、弱陽性、強陽性)和細胞體大小不同,激光束射互細胞上的前向角和散射角有所不同,以X軸為吸光率標記(酶反應(yīng)強度),Y軸為光散射(細胞大?。?。每個細胞產(chǎn)生的兩個信號結(jié)合定位在細胞圖上(圖2-18)。每秒鐘儀器可測上千個細胞。計算機系統(tǒng)對存儲的資料進行分析處理,并結(jié)合嗜好堿性粒細胞或分葉核粒細胞通道結(jié)果計算出白細胞總參數(shù)和分類良數(shù)。


圖2-18 激光與細胞化學(xué)聯(lián)合檢測白細胞直方示意圖


4.多角度偏振光散射白細胞分類技術(shù)(multi — Angle polatised scatter separation of white cell,MAPSS)其原理是一定體積的全血標本用鞘流液按適當比例稀釋。其白細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)近似于自然狀態(tài),因嗜堿性粒細胞嘌粒具有吸濕的特性,所以嗜堿性粒細胞的結(jié)構(gòu)有輕微改變。紅細胞內(nèi)部的滲透透壓高于鞘興高采烈的滲透壓而發(fā)生改變,紅細胞內(nèi)的血紅蛋白從細胞內(nèi)游離出來,而鞘液內(nèi)的水分進入紅細胞中,細胞膜的結(jié)構(gòu)仍然完整,但此時的紅細胞折炮指數(shù)與鞘液的相同,故紅細胞不干擾白細胞檢測。


在水動力系統(tǒng)的作用下,樣本被集中為一個直徑為30μm的小股液流,該液流將稀釋細胞單個排列,因是單個通過激光束,故在各個方向都有其散射光??梢詮乃膫€角度測定散射光的密度(見圖2-19):①00:前角光散射(10~30)粗略地測定細胞大??;②100:狹角光散射(70~110)測細胞結(jié)構(gòu)及其復(fù)雜性的相對特征;③900:900消偏振光散射(700`~1100),基于顆粒可以將垂直角度的偏振激光消偏振的特性,將嗜酸細胞從中性粒細胞和其它細胞中分離出來。④900:垂直光散射(700~1100)主要對細胞內(nèi)部顆粒和細胞成分進行測量??梢詮倪@四個角度同時對個白細胞進行測量,同一種特定的程序自動儲存和分析數(shù)據(jù),將白細胞分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。


圖2-19 MAPSS測量原理

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