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　　隨著組織工程領(lǐng)域的發(fā)展，生物材料界面與細(xì)胞的相互作用及物理機制成為研究熱點。生物界面的拓?fù)湫蚊部梢杂行д{(diào)控細(xì)胞行為并影響細(xì)胞功能。而體內(nèi)的一些生理過程如胚胎發(fā)育、免疫應(yīng)答和組織更新與重塑等往往涉及多細(xì)胞的集體行為。腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移也與集體細(xì)胞的協(xié)調(diào)運動有關(guān)。細(xì)胞球作為一種體外三維細(xì)胞培養(yǎng)模型，具有強烈的細(xì)胞-細(xì)胞相互作用，可在細(xì)胞生理學(xué)、信號通路、基因和蛋白表達(dá)以及氣體/營養(yǎng)物質(zhì)梯度等方面更好地模擬體內(nèi)環(huán)境。因此，明確材料表面拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)與細(xì)胞球的相互作用對探究體內(nèi)生理、病理機制具有重要意義。然而，當(dāng)前同時具有厘米級尺度和微納米精度的跨尺度微納拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)尚難以快速制備。 

　　近日，中國科學(xué)院理化技術(shù)研究所仿生智能界面科學(xué)中心有機納米光子學(xué)實驗室研究員鄭美玲團隊在跨尺度微納拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)制備及細(xì)胞球浸潤性調(diào)控方面取得了新進展。該團隊提出采用飛秒激光無掩膜投影光刻技術(shù)（MOPL）制備大面積兼具高精度的微盤陣列拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)以研究細(xì)胞球的浸潤性。該研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞球在多種不同單元直徑的微盤陣列拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)上展示出不同的浸潤速度。研究通過分析細(xì)胞形態(tài)、骨架分布和細(xì)胞黏附，解析了細(xì)胞球浸潤速度的變化機制，并發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞球在大尺寸和小尺寸的微盤結(jié)構(gòu)單元上采取不同的浸潤模式。該研究揭示了細(xì)胞球?qū)绯叨任⒓{拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的響應(yīng)機制，為探討組織浸潤行為提供了參考。 

　　MOPL是一種高效率且能靈活化地制備微納拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的技術(shù)。考慮到單個細(xì)胞的尺寸以及細(xì)胞球浸潤過程中與大面積拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)的相互作用，該工作利用MOPL技術(shù)制備了高度低于1μm，且拓?fù)鋯卧睆椒謩e為2、5、20和50 μm的大面積（8 mm × 10 mm）微盤陣列結(jié)構(gòu)（圖1）。 

　　該研究采用超低吸附法制備了大小均一的人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞的細(xì)胞球。進一步，科研人員利用激光掃描共聚焦熒光顯微鏡對細(xì)胞球在微盤陣列拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)上的動態(tài)浸潤行為進行觀察。細(xì)胞球在一系列微盤陣列拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)上發(fā)生了完全浸潤并展現(xiàn)出不同的浸潤面積。結(jié)合細(xì)胞球鋪展理論，通過量化不同時間點的細(xì)胞球浸潤面積，研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞球的浸潤速度在2、5、50和20 μm直徑的微盤結(jié)構(gòu)單元上依次減小，且細(xì)胞球在直徑為20 μm的微盤結(jié)構(gòu)單元上具有較小的細(xì)胞-基底黏附能（圖2）。 

　　進一步地，研究人員利用免疫熒光染色分析了多種不同微盤結(jié)構(gòu)上的細(xì)胞形態(tài)、肌動蛋白和黏著斑分布，提出了細(xì)胞球在直徑2μm和5 μm的小尺寸的微盤結(jié)構(gòu)上采取攀爬模式浸潤，以及在直徑20μm和50 μm的較大尺寸的微盤結(jié)構(gòu)上采取繞行模式浸潤（圖3）。細(xì)胞球的浸潤過程表現(xiàn)為一種多細(xì)胞的集體協(xié)調(diào)運動。 

　　該研究揭示了細(xì)胞球在各向同性微盤陣列拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)表面的浸潤機制，深化了對于細(xì)胞球與界面拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)相互作用的認(rèn)知。本工作是飛秒激光面投影納米光刻技術(shù)及應(yīng)用的拓展。相關(guān)研究成果發(fā)表在Small上。研究工作得到國家重點研發(fā)計劃“納米科技”重點專項、國家自然科學(xué)面上基金項目和中科院國際伙伴計劃等的支持。 

　　論文鏈接 

圖1.飛秒激光無掩膜投影光刻示意圖及制備的微盤陣列拓?fù)浣Y(jié)構(gòu) 

圖2.細(xì)胞球在多種拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)上的動態(tài)浸潤過程與分析 

圖3.細(xì)胞球的攀爬浸潤和繞行浸潤模式解析